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皮克級數字ELISA靈敏度

來源: 發(fā)布時間:2025-07-16

芯棄疾JX-8B數字ELISA具有超敏的優(yōu)點:

檢測方法為陣列成像。陣列成像涉及對陣列中的每個孔進行檢測以確定是否存在微球并判斷微球是否具有酶活性。為此,開發(fā)了一種圖像分析軟件,該軟件首先創(chuàng)建一個陣列的“掩?!保远x孔定位和邊界進行檢測。然后將孔掩模應用于陣列的熒光圖像,以確定孔內微球和酶的存在。對于陣列的熒光圖像,當進行多重檢測時,會生成微球群體或微球亞群的熒光強度直方圖。直方圖中的峰值自動識別并用于確定微球群體。 芯棄疾JX-8B單分子小型化ELISA檢測產品,微量多重檢測,微量樣本就能同時測試4項指標;皮克級數字ELISA靈敏度

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由于活性珠子的百分比接近50%(酶與微球的比例大于~1:1.5),然而,使用圖像分析軟件區(qū)分“開啟”和“關閉”孔變得具有挑戰(zhàn)性,我們達到了數字動態(tài)范圍的實際上限。例如,圖2中7fM(~45%活性)的信號偏離了線性。因此,這里使用50,000個孔展示的數字線性動態(tài)范圍是從3.5fM到350zM,即大約四個對數單位。前提是蛋白質使用適當的酶濃度進行標記,這種動態(tài)范圍對于許多臨床應用來說是足夠的 創(chuàng)新性數字ELISA芯棄疾JX-8B數字ELISA,超敏檢測,常規(guī)試劑可輕松達到0.2pg!

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我公司推出的數字化高靈敏ELISA芯片檢測產品應用場景:適合生物實驗室、醫(yī)學實驗室、科研市場、產品預研、產品開發(fā)、ELISA檢測、動物病情檢測等各種應用場景應用范圍:各種高靈敏多重免疫檢測,可替代各種ELISA試劑盒,及其他免疫檢測產品。將200,000個功能化DNA捕獲探針與100μL孵育含有目標DNA的溶液(5‘-TTGACGGCGAAGACCTGGATGTATTGCTCCTCTGAACGGTAGCATCTTGACAAC-3‘孵育2小時后,移除DNA靶標溶液,用0.2×SSC緩沖液洗滌珠子三次含有0.1%Tween-20的微球重新懸浮并與10nM混合生物素標記的信號探針(5‘-TACATCCAGGTCTTCGCCGTCAA/生物素/-3’)對目標DNA具有特異性,孵育1小時。然后將珠子在去除信號探針后用含0.1%吐溫-20的0.2×SSC緩沖液洗滌三次。隨后向珠子沉淀中加入10pMS阝G溶液,混勻并混合1小時。然后將珠子分離并在含0.1%吐溫-20的5×PBS緩沖液中洗滌六次。重懸于10μLofPBS中并加載到飛升微升孔陣列上。

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它是一種DVD大小的圓盤,由24個陣列組成,每個陣列包含240微米大小的微孔,這些微孔呈徑向排列,以便使用藍光制造工藝和儀器內的液體處理并行處理。圖2B顯示了集成陣列及其相關流體通道的設計。每個陣列由216,000個40飛升大小的微孔組成,以六邊形緊密排列模式排列在平面表面的3×4毫米區(qū)域內。每個微孔的標稱尺寸為4.25μm直徑、3.25μm深度和8μ米中心間距。流體通道深0.5毫米,通道和流體入口端口的總體積為74μLto,可容納珠子和密封油溶液。通道中包含一個收縮部分以減少液體回流。微珠的分級是西莫亞技術的關鍵要求,微孔的幾何形狀足以容納單個微珠(2.7μmdiameter;以下簡稱珠子)。西莫亞圓盤由環(huán)烯烴共聚物(COP)制造,因其具有高通量注塑成型的適應性,且成本低廉。具有良好的化學、生物和光學性能 芯棄疾JX-8B數字ELISA,人人都用能得起的單分子檢測;

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   創(chuàng)新性的解決方案:芯棄疾JX-8B數字ELISA應用范圍:各種高靈敏多重免疫檢測,可替代各種ELISA試劑盒,及其他免疫檢測產品。循環(huán)血液轉化為~2×10?15M(或2飛摩爾,fM);早期HIV傳染血清中每mL含有10-3000個病毒顆粒,相當于p24抗原濃度范圍為從50×10?18M(50attomolar,aM)到15×10?15M(15fM)10.嘗試開發(fā)能夠測量這些蛋白質濃度的方法集中在蛋白質上的核酸標記復制,11,12或測量整體、結合標記蛋白分子的性質13-16。Mirkin等人12,17及其他研究者18使用基于金納米顆粒和DNA生物條形碼的標記物,已將蛋白質的檢測范圍擴展至低飛摩爾水平;更近使用該技術的一篇報道展示了檢測到10飛摩爾PSA插入物17。這些方法所達到的靈敏度然而,檢測蛋白質仍然落后于核酸,如聚合酶鏈反應(PCR),從而限制了蛋白質組中具有已在血液中檢測到6,19。單個蛋白質分子的分離和檢測為測量極低濃度的蛋白質s1,2提供了一種有希望的方法。POCT 芯片搭配小型化設備,即時檢測 hs-cTnT 等指標,為急診救治提供快速數據支持。單分子技術數字ELISA超敏檢測

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單分子酶檢測到的比較低酶分子數假設蛋白質檢測分析的更終靈敏度為背景信號可能由非特異性相互作用產生。為了評估內在敏感性,我們通過將400,000個帶有生物素的珠子與不同濃度的酶綴合物鏈霉親和素-阝-半乳糖苷酶(S阝G)混合,創(chuàng)建了具有明確酶與珠子比例的珠子群體。為了方便起見,生物素化珠子是通過將生物素化DNA與功能化的珠子雜交提供的?;パaDNA。[我們注意到,該實驗不應被視為敏感的DNA檢測;該檢測的敏感性受到非特異性相互作用的限制,如補充圖2所示,這些相互作用發(fā)生在酶綴合物和表面結合的DNA之間。 皮克級數字ELISA靈敏度