直接測定DNA合成是細胞增殖檢測的準確方法之一，EdU細胞增殖檢測試劑盒采用另外一種胸腺嘧啶核苷酸類似物-EdU（5-乙炔基-2’脫氧尿嘧啶核苷），在細胞增殖時EdU能夠插入正在復制的DNA分子中，利用EdU與染料之間的點擊化學(ClickChemistry)反應可以進行高效快速的細胞增殖檢測分析，可以有效地檢測處于S期的細胞百分數(shù)。與傳統(tǒng)的免疫熒光染色（BrdU）檢測方法相比(圖1)，更簡單，更快速，更準確。EdU只有BrdU抗體大小的1/500，在細胞內(nèi)更容易擴散，不需要嚴格的樣品變性（酸解、熱解、酶解）處理，有效地避免了樣品損傷，有助于在組織、的整體水平上觀測細胞增殖的真實情況，具有更高的靈敏度和更快的檢測速度。EdU分析方法反應條件比較溫和，我們提供的一系列AndyFluor?染料標記可以用于多色通道選擇，也可以用于培養(yǎng)細胞分析及組織切片分析（圖2）。EdU細胞增殖檢測試劑盒廠家。福建咨詢EdU細胞增殖檢測試劑盒原理

EdU法中的點擊反應原理圖。摻入到細胞DNA中的EdU與熒光探針或生物素等標記的疊氮化物，在銅離子的催化下發(fā)生共價反應，形成穩(wěn)定的三唑環(huán)，使細胞DNA標記上熒光探針或生物素。細胞增殖檢測是評估細胞活性、遺傳毒性及抗藥物效果等的基礎實驗手段。細胞增殖檢測的方法按照原理通?？梢苑譃槲孱悾耗p傷檢測、代謝活性檢測、ATP水平測定、DNA合成檢測和細胞熒光標記檢測法。目前公認的精確的檢測細胞增殖的方法是直接檢測細胞中DNA的合成湖北哪一家EdU細胞增殖檢測試劑盒哪家好上海EdU細胞增殖檢測試劑盒的發(fā)展趨勢。

EdU只有BrdU抗體大小的1/500，在細胞內(nèi)更容易擴散，不需要嚴格的樣品變性（酸解、熱解、酶解）處理，有效地避免了樣品損傷，有助于在組織、的整體水平上觀測細胞增殖的真實情況，具有更高的靈敏度和更快的檢測速度。AdrianSalic特別強調(diào)：“與傳統(tǒng)的免疫熒光染色不同，EdU反應能在幾分鐘內(nèi)完成，且不需要進行嚴格的樣品變性處理，使得組織成像更簡單易行?！奔毎鲋硻z測方法基于EdU與Apollo？熒光染料的完美結合準確檢測新合成的DNA，簡單，快速，準確。這種檢測方法非?？焖伲抑恍韬唵蔚膸讉€步驟，因此也適用于高通量篩選試驗，如在藥物篩選中檢測加藥后細胞的活力。

與BrdU檢測方法相比，EdU檢測方法更快速、更靈敏、更準確。EdU染料只有BrdU抗體的1/500，在細胞內(nèi)很容易擴散，無需DNA變性（酸解、熱解、酶解等），可有效避免樣品損傷，而且無需抗原抗體反應，能在細胞和組織水平更準確地反映DNA復制活性。EdU（5-Ethynyl-2’-deoxyuridine）是一種胸腺嘧啶核苷類似物，能夠在細胞增殖時期代替胸腺嘧啶（T）滲入正在復制的DNA分子中，通過基于EdU與Apollo熒光染料的特異性反應快速檢測細胞DNA復制活性，適用于細胞增殖、細胞分化、生長與發(fā)育、DNA修復、病毒復制、細胞標記示蹤等方面的研究，尤其適合進行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他藥物的篩選實驗。EdU細胞增殖檢測試劑盒的基本結構級應用。

BrdU法和BeyoClick?EdU法檢測原理的比較。A.BrdU法需使用大分子的BrdU抗體，由于空間位阻，雙鏈DNA須變性后才能使BrdU抗體與BrdU結合。法使用小分子標記的疊氮化物(Azide)，無需DNA變性，操作更便捷，兼容性好，檢測結果更加穩(wěn)定可靠。本試劑盒檢測快速。相對于BrdU法，本試劑盒采用BeyoClick?EdU法檢測新合成的DNA，所需時間縮短。經(jīng)本試劑盒處理后，增殖的細胞呈棕色，可以用普通光學顯微鏡進行觀察。HeLa細胞用本試劑盒檢測細胞增殖的效果參見圖3。圖3.HeLa細胞用本試劑盒檢測細胞增殖的效果圖。無EdU組觀察不到棕色染色(左側一列)；EdU(10μM)孵育2小時組有明顯的棕色染色(中間一列)；而用10mM的DNA合成抑制劑羥基脲(Hydroxyurea)提前預處理0.5小時后，棕色染色減弱，說明DNA合成被抑制后，EdU的摻入被抑制(右側一列)。EdU細胞增殖檢測試劑盒怎樣使用？上海東寰告訴您。安徽口碑好的EdU細胞增殖檢測試劑盒哪家好

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上海東寰活細胞能將四咪唑鹽（如MTT、XTT、WST-1）還原成有色的甲瓚或甲瓚鹽（Formazan），可通過分光光度計或酶標儀進行檢測。CellCountingKit–8（96992）和CellProliferationReagentWST-1中的WST-8被細胞內(nèi)脫氫酶生物還原后生成的橙色甲臜染料能夠溶解在組織培養(yǎng)基中，生成的甲臜量與活細胞數(shù)量成正比?；贑CK-8（WST-8）的試劑盒能高度準確地檢測細胞增殖，比MTT法及XTT法的靈敏度高5倍，能檢測更低的細胞數(shù)目。該試劑盒可適用于96孔板培養(yǎng)的貼壁或懸浮細胞。福建咨詢EdU細胞增殖檢測試劑盒原理